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肺炎支原体PCR检测试剂盒

  • 更新时间:  2019-05-24
  • 产品型号:  
  • 简单描述
  • 肺炎支原体PCR检测试剂盒是即用型PCR试剂盒的改良产品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等所有PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR 反应,具有广泛的用途。
详细介绍

反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G C含量以40-60%为宜,G C太少扩增效果不佳,G C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

产品名称

肺炎支原体PCR检测试剂盒

英文名称

 

分类

PCR检测试剂盒

特点:
高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
高灵敏度:检测灵敏度可达10~100;
操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀释阳性对照(以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3。用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7。换枪头,在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中,得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。8。重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
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使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

7239-47-7 5mg
雷公藤内酯甲 Wilforlide A 84104-71-2 20mg
去甲泽拉木醛 Demethylzeylasteral  107316-88-1  20mg
龙胆苦苷 Gentiopicroside 20831-76-9 20mg
龙胆山酮酚 Bellidifolin 2798-25-6 10mg
罗汉果苷ⅴ Mogroside V 88901-36-4 20mg
Adenosine 5'-diphosphate 二磷酸腺苷 1g  瓶
Acridine Orange 吖啶橙 5g  瓶
IAA-Na 3-吲哚乙酸钠 5g  瓶
Cesium choride(CsCl) 化铯 25g  瓶
醋酸纤维素滤膜(50片-盒) 直径100mm 孔径0.22um  盒
L-Alanyl-L-glutaMine L-丙氨酰-L-谷氨酰胺 1g  瓶
蛋白质提取   
透析袋 扁宽18 截留分子量10000 0.5m/即用型  管
羊抗兔IgG-RBITC 0.5ml  支
α-mangostin α-倒捻子素 1551491  20mg
Eosin Y 伊红Y (水溶) 10g  瓶
兔抗ACVR1C多克隆抗体 英文名:Anti-ACVR1C rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗ACTL8多克隆抗体 英文名:Anti-ACTL8 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗ACTN3多克隆抗体 英文名:Anti-ACTN3 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗ACTR1A多克隆抗体 英文名:Anti-ACTR1A rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗ACTR3B多克隆抗体 英文名:Anti-ACTR3B rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗ACTRT1多克隆抗体 英文名:Anti-ACTRT1 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗ACY3多克隆抗体 英文名:Anti-ACY3 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗ACOT9多克隆抗体 英文名:Anti-ACOT9 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗ACOT8多克隆抗体 英文名:Anti-ACOT8 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗ACYP1多克隆抗体 英文名:Anti-ACYP1 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗AA多克隆抗体 英文名:Anti-AA rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗AAM10多克隆抗体 英文名:Anti-AAM10 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
利卡灵-B (-)-Licarin B 51020-87-2 20mg
萝卜硫素(98%) Sulforaphane 4478-93-7 20mg
络石苷 Tracheloside 33464-71-0 20mg
轮环藤碱 Cycleanine 518-94-5 20mg 
肺炎支原体PCR检测试剂盒灵芝酸 A Ganoderic acid A 81907-62-2 20mg 
灵芝酸 B Ganoderic acid B 81907-61-1 10mg
藜芦酸 3,4-Dimethoxybenzoic acid  34152 20mg
3',4',5,6,7,8-六甲氧基黄酮 (川陈皮素) 3’,4’,5,6,7,8-Hexamethoxyflavone 478-01-3 20mg
落新妇苷 Astilbin 29838-67-3 20mg
莽草酸 Shikimic acid 138-59-0 20mg
木糖醇 Xylitol 87-99-0 20mg
木犀草苷 Cynaroside 1268798 20mg

 


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