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DOP-PCR试剂盒

  • 更新时间:  2019-05-24
  • 产品型号:  
  • 简单描述
  • DOP-PCR试剂盒是即用型PCR试剂盒的改良产品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等所有PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR 反应,具有广泛的用途。
详细介绍

反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G C含量以40-60%为宜,G C太少扩增效果不佳,G C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

产品名称

DOP-PCR试剂盒

英文名称

 

分类

PCR检测试剂盒

特点:
高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
高灵敏度:检测灵敏度可达10~100;
操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀释阳性对照(以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4。在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5。换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头,在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中,得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
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使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗CLEC1B多克隆抗体 英文名:Anti-CLEC1B rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗CLEC4多克隆抗体 英文名:Anti-CLEC4 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗CLEC2多克隆抗体 英文名:Anti-CLEC2 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
甲基当药宁 Methylswertianin 22172-17-4 10mg
诃子鞣质   Chebulagic acid 23094-71-5 10mg
焦袂康酸 3-hydroxy-4H-pyran-4-one  496-63-9  20mg
5-O-甲基维斯阿米醇苷 5-O-Methylvisammioside 84272-85-5 20mg
4-甲氧基水杨酸 4-Methoxysalicylic acid 2237-36-7 20mg
咖啡酸 Caffeic acid 331-39-5 20mg
柯里拉京 Corilagin 23094-69-1 20mg
熊果酸 Ursolic acid 77-52-1 20mg
齐墩果酸 Oleanic acid 508-02-1 20mg
科罗索酸 Corosolic acid 4547-24-4 20mg
山楂酸 Maslinic acid 4373-41-5 20mg
款冬酮 Tussilagone 110042-38-1 20mg
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假单胞分离琼脂 现货促销 250 用于假单胞菌群的测定
苯丙氨酸脱氨酶培养基    现货促销 100 用于苯丙氨酸脱氨酶试验
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碱性胆盐琼脂 特价供应 250(g) 
MR-VP培养基 特价供应 250(g) 
RVS 肉汤 特价供应 250 用于食品中沙门氏菌检验选择性增菌(ISO标准)
 角质细胞培养基(特定) 500 ml特价供应 KM-d
 Littman 琼脂基础 250g/瓶 用于真菌的 分离培养 ,每  100ml培养基中添加 0.3g 链霉素特价供应
TRITC标记的驴抗兔IgG 英文名:TRITC-conjugate onkey Anti-Rabbit IgG 冷冻(-20℃) 避光
AMCA标记的驴抗兔IgG 英文名:AMCA-conjugate onkey Anti-Rabbit IgG 冷冻(-20℃) 避光
生物素标记的驴抗兔IgG 英文名:Biotin-conjugate onkey Anti-Rabbit IgG 冷冻(-20℃) 避光
HRP标记的驴抗兔IgG 英文名:HRP-conjugate onkey Anti-Rabbit IgG 冷冻(-20℃) 避光
AP标记的驴抗兔IgG 英文名:AP-conjugate onkey Anti-Rabbit IgG 冷冻(-20℃) 避光
HRP标记的山羊抗兔IgG 英文名:HRP-conjugate Goat Anti-Rabbit IgG 冷冻(-20℃) 
HRP标记山羊抗兔IgG(免疫组化,即用型) 英文名:HRP-conjugate Goat Anti-Rabbit IgG for
FITC标记的驴抗小鼠IgG 英文名:FITC-conjugate onkey Anti-Mouse IgG 冷冻(-20℃) 避光
Cy3标记的驴抗小鼠IgG 英文名:Cy3-conjugate onkey Anti-Mouse IgG 冷冻(-20℃) 避光
TRITC标记的驴抗小鼠IgG 英文名:TRITC-conjugate onkey Anti-Mouse IgG 冷冻(-20℃) 避光
生物素标记的驴抗小鼠IgG 英文名:Biotin-conjugate onkey Anti-Mouse IgG 冷冻(-20℃) 避光
HRP标记的驴抗小鼠IgG 英文名:HRP-conjugate onkey Anti-Mouse IgG 冷冻(-20℃) 
金雀花碱 Cytisine 485-35-8 20mg
积雪草酸 Asiatic acid 464-92-6 20mg
积雪草苷 Asiaticoside 16830-15-2 20mg
羟基积雪草酸 Madecassic acid 18449-41-7 20mg
DOP-PCR试剂盒羟基积雪草苷 Madecassic acid 34540-22-2 20mg
鸡II型胶原蛋白   20mg
金丝桃苷 Hyperoside  482-36-0 20mg
2”-O-没食子酰基金丝桃苷 2”-O-Galloylhyperin 53209-27-1 20mg
金丝桃素 Hypericin 548-04-9 20mg
桔梗皂苷D Platycodin D 58479-68-8 20mg
去芹菜糖桔梗皂苷D Deapio-platycodin D 78763-58-3 10mg
加拿大28神测网桔梗皂苷元 platycodigenin 22327-82-8  20mg

 


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